| 冼静雯,吴海强,简晓莉,刘志刚.小麦和荞麦过敏原的分离与免疫学特性初步鉴定[J].麦类作物学报,2008,28(5): |
| 小麦和荞麦过敏原的分离与免疫学特性初步鉴定 |
| Extraction, Isolation and Immunological Identification of Allergens from Triticum Aestivum and Fagopyrum Esculentum |
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| DOI：10.7606/j.issn.1009-1041.2008.05.174 |
| 中文关键词: 小麦 荞麦 过敏原 免疫学特性 |
| 英文关键词:Western-Blotting |
| 基金项目: |
| 冼静雯 吴海强 简晓莉 刘志刚 |
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| 中文摘要: |
| 为了提取、分离小麦(Triticum aestivum)和荞麦(Fagopyrum esculentum)的主要过敏原并对其免疫学特性进行鉴定,以磷酸盐缓冲液(PBS)制备小麦和荞麦总蛋白粗提液,通过SDS-PAGE分析总蛋白组成,利用麦类食品过敏患者血清中的IgE能特异性结合过敏原的特性,通过免疫印迹(Western-Blotting)鉴定其中的过敏原成分,然后用离子交换层析(DE-52)对总蛋白进行初步分离,并用Western-Blotting鉴定分离后组份的免疫学特性.SDS-PAGE分析显示,小麦蛋白条带共有18条,其中主要条带有12条(55、42、39、36、29、27、23、21、18、15、12、9 kD);荞麦蛋白条带共有17条,其中主要条带有8条(55、44、36、32、22、16、13、10 kD).Western-Blotting鉴定表明,小麦阳性条带有9条(36、32、29、26、23、18、15、12、9 kD),其中23 kD的过敏原特异性最强;荞麦阳性条带有5条(55、36、32、29、22 kD),其中22 kD的过敏原特异性最强.DE-52阴离子交换层析分离后经Western-Blotting分析显示,分离后过敏原的相对含量均有显著提高,且依然具有较强的免疫学活性,如经纯化后荞麦22 kD的过敏原相对含量由10.73%提高到21.07%.初步鉴定出小麦的主要过敏原为23 kD蛋白,而荞麦的主要过敏原为22 kD蛋白. |
| 英文摘要: |
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