李琳,徐兆师,刘丽,于卓,李连城,陈明,马有志.小麦热激蛋白WHSP90基因的原核表达及多克隆抗体制备[J].麦类作物学报,2009,29(3): |
小麦热激蛋白WHSP90基因的原核表达及多克隆抗体制备 |
Expression of Wheat Heat Shock Protein WHSP90 Gene and Preparation of Its Polyclonal Antibodies |
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DOI:10.7606/j.issn.1009-1041.2009.03.081 |
中文关键词: 小麦 原核表达 蛋白纯化 多克隆抗体 |
英文关键词:HSP90 |
基金项目:国家自然科学基金,国家高技术研究发展计划(863计划)? |
李琳 徐兆师 刘丽 于卓 李连城 陈明 马有志 |
李琳,LI Lin(内蒙古农业大学农学院,内蒙古呼和浩特,010019;国家农作物基因资源和基因改良重大科学工程,农业部作物遗传育种重点开放实验室,中国农业科学院作物科学研究所,北京,10081) ;徐兆师,刘丽,李连城,陈明,马有志,XU Zhao-shi,LIU Li,LI Lian-cheng,CHEN Ming,MA You-zhi(国家农作物基因资源和基因改良重大科学工程,农业部作物遗传育种重点开放实验室,中国农业科学院作物科学研究所,北京,10081) ;于卓,YU Zhuo(内蒙古农业大学农学院 |
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中文摘要: |
为了进一步研究HSP90基因的功能,将WHSP90基因构建到原核表达载体pET-28a(+)中,得到His-WHSP90融合表达载体,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,发现1 mmol/L IPTG诱导4 h蛋白表达量最大;经过蛋白标记亲和层析柱(HisTrapTMHP)纯化得到的纯化蛋白浓度达到0.4 mg/mL.免疫家兔制备抗体,用间接ELISA法检测免疫后家兔抗血清效价大于125 000,满足后续试验要求的效价值,为在蛋白水平上研究WHSP90基因功能提供了基础. |
英文摘要: |
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