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刘阳娜,陈明,李连城,张晓科,徐兆师,马有志.核蛋白筛选系统(NTT)的建立及鉴定[J].麦类作物学报,2007,27(3):386
核蛋白筛选系统(NTT)的建立及鉴定
Construction and Identification of a Nuclear Transportation Trap (NTT) System
  修订日期:2007-03-17
DOI:10.7606/j.issn.1009-1041.2007.03.095
中文关键词:  核蛋白  核定位信号  酵母筛选系统  核蛋白  筛选系统  Trap  Transportation  Nuclear  Identification  Construction  意义  机制  作用  胁迫条件  环境  细胞发育  调控  蛋白基因  动态  分离  文库  效率  研究构建
英文关键词:Nuclear proteins,Nuclear localization signals,Yeast selective system
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划)
刘阳娜  陈明  李连城  张晓科  徐兆师  马有志
西北农林科技大学农学院,国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程农业部作物遗传育种重点开放实验室中国农业科学院作物科学研究所,国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程农业部作物遗传育种重点开放实验室中国农业科学院作物科学研究所,西北农林科技大学农学院,国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程农业部作物遗传育种重点开放实验室中国农业科学院作物科学研究所,国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程农业部作物遗传育种重点开放实验室中国农业科学院作物科学研究所 陕西杨凌712100,国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程,农业部作物遗传育种重点开放实验室,中国农业科学院作物科学研究所,北京100081,北京100081,北京100081,陕西杨凌712100,北京100081,北京100081
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中文摘要:
      为了研究植物核蛋白的组成及其在各种环境条件下的动态变化,利用核蛋白的核定位信号(nuclear localization signals,NLS)筛选编码核蛋白的基因,建立了一套快速、省力、低成本的核蛋白筛选系统(nuclear transportation trap,NTT).通过鉴定发现,将合成的SV40蛋白大T抗原的核定位信号序列插入筛选载体的多克隆位点,转化酵母EGY48,插入核定位信号的筛选载体转化酵母后可以在选择性培养基(SD/His-/Leu-)上生长,而没有插入核定位信号的筛选载体转化酵母后不能在选择性培养基上生长,从而证明此核蛋白筛选系统有效.比较实验表明,本研究构建的核蛋白筛选系统与已报道的系统相比筛选效率更高.利用此系统从cDNA文库中分离编码核蛋白的基因,对于研究核蛋白的动态组成、了解核蛋白基因在调控细胞发育及其环境胁迫条件下的作用机制具有重要的意义.
英文摘要:
      To study the composition of nuclear proteins and its dynamic variation under various environmental conditions,a high-efficiency nuclear transportation trap(NTT) system was constructed to clone genes encoding nuclear proteins that contain all kind of nucle
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