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栾凤侠,张洪祥,白月.转基因小麦的定性PCR筛选检测技术[J].麦类作物学报,2007,27(3):378
转基因小麦的定性PCR筛选检测技术
Screening and Detecting of Genetically Modified Components in Transgenic Wheat by PCR
  修订日期:2006-11-28
DOI:10.7606/j.issn.1009-1041.2007.03.093
中文关键词:  小麦  转基因  PCR  定性检测  转基因  小麦  筛选检测  检测技术  Transgenic Wheat  Components  Modified  Detecting  通用性  检测方法  检测灵敏度  结果  确证实验  实时荧光定量  大小  预期  凝胶电泳分析  琼脂糖  优化  反应条件
英文关键词:Wheat,Transgenic,PCR,Qualitative detection
基金项目:国家质量监督检验检疫总局科研项目 , 科技部社会公益研究专项重点项目子课题
栾凤侠  张洪祥  白月
黑龙江出入境检验检疫局 黑龙江哈尔滨150001
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中文摘要:
      为了建立转基因小麦的PCR检测方法标准,以B73、B72、B102三个被转入外源高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)基因的转基因小麦品系为材料,对目前国内外转基因小麦中通用的标记基因bar和uidA、NOS终止子和Ubiquitin启动子进行了定性PCR的筛选检测,在国内外首次找到了小麦中特有的内参照基因麦谷醇溶蛋白基因(GAG56D),设计并合成了麦谷醇溶蛋白基因(GAG56D)和Ubiquitin启动子的引物序列,并对PCR反应条件进行了优化,PCR产物经过琼脂糖凝胶电泳分析后,可以检测到预期大小的目的片段.同时对PCR产物用实时荧光定量PCR进行了确证实验,并得到预期的结果.定性PCR最低检测灵敏度为0.5%(w/w).建立的转基因小麦定性PCR筛选检测方法具有通用性.
英文摘要:
      As the transgenic products being managed strictly in many countries and the great progress achieved in commercial transgenic wheat,it is important to established the detection methods of transgenic wheat.Genomic DNA from wheat was extracted from B73,B72 a
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