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余宇,王晓杰,韩青梅,康振生.条锈菌诱导下的小麦叶片总RNA提取方法的比较及LD-PCR扩增[J].麦类作物学报,2007,27(3):471
条锈菌诱导下的小麦叶片总RNA提取方法的比较及LD-PCR扩增
Comparison of Different Protocols of Extracting Total RNA from Rust Induced Wheat Leaves and LD-PCR Amplification
  修订日期:2007-02-10
DOI:10.7606/j.issn.1009-1041.2007.03.113
中文关键词:  小麦  条锈菌  RNA  LD-PCR  条锈菌  小麦叶片  提取  方法  比较  Amplification  Wheat Leaves  Induced  Total  Protocols  Different  因素  综合  成本  反转录合成  范围  大小  鲜重  高产量  结果
英文关键词:Wheat,Yellow Rust,RNA,LD-PCR
基金项目:教育部长江学者和创新团队发展计划 , 教育部科技计划 , 国家自然科学基金
余宇  王晓杰  韩青梅  康振生
西北农林科技大学植物保护学院陕西省农业分子生物学重点实验室 陕西杨凌712100
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中文摘要:
      为寻找一种既能提取到高质量高产量小麦RNA、又能提取到高质量条锈菌RNA的方法,利用Trizol法、Licl法、SDS法和Bizol法分别从条锈菌诱导的小麦叶片中提取了总RNA,并对Trizol法和Bizol法提取的RNA进行了长距离PCR(LD-PCR)扩增.结果表明,Trizol法、Licl法、SDS法和Bizol法提取的RNA产量(μg/100 mg鲜重叶片)分别为4.72、1.15、1.56、10.43 μg/100 mg,Trizol法和Bizol法提取的RNA产量明显高于Licl法和SDS法.Trizol法提取的RNA合成的cDNA片段大小主要集中在0.25~2.0 kb范围内,而Bizol法提取的RNA合成的cDNA片段大小主要集中在0.5~5.0 kb范围内,Bizol法提取的RNA反转录合成的cDNA质量好于Trizol法.Bizol法同样能提取到高质量的条锈菌RNA,而且提取RNA的成本较低.综合各种因素,Bizol法是条锈菌诱导下的小麦叶片总RNA提取的较理想方法.
英文摘要:
      
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