| 廖勇,张增艳,徐惠君,杜丽璞,姚乌兰,辛志勇,任正隆.基因枪法介导转人工合成Rs-AFP2基因小麦的获得和检测[J].麦类作物学报,2006,26(4):15 |
| 基因枪法介导转人工合成Rs-AFP2基因小麦的获得和检测 |
| Transferring of An Antifungal Protein Gene(Rs-AFP2) of Radish into Wheat Mediated with Biolistic Particle |
| 修订日期：2006-03-27 |
| DOI：10.7606/j.issn.1009-1041.2006.04.143 |
| 中文关键词: 萝卜抗菌肽Rs-AFP2 小麦 转基因 载体构建 |
| 英文关键词:Antifungal protein(AFP),Wheat,Transformation,Construction of expression vector |
| 基金项目:国家科技攻关项目 |
| 廖勇 张增艳 徐惠君 杜丽璞 姚乌兰 辛志勇 任正隆 |
| [1]中国农业科学院作物科学研究所,国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程,农业部作物遗传育种重点开放实验室,北京100081 [2]四川农业大学农学院,四川雅安625000 |
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| 中文摘要: |
| 萝卜（Raphanus sativus）抗菌肽Rs—AFP2在体外强烈抑制小麦赤霉病菌（Fusarium graminenrum）、黄色镰孢菌（Fusarium culmorum）、烟草赤星病（Alternaria longipes）的菌丝生长。为了研究Rs-AFP2在小麦抗病育种上的应用潜力，人工合成了Rs-AFP2基因。通过基因重组技术（包括限制性内切酶酶切和连接），将人工合成的R以FP2基因替代单子叶高效组成型表达栽体pAHC25中的GUS基因，构建了R￡AFP2基因的单子叶高效表达栽体pUAFP2。该栽体除携带受Ubiquitin启动子控制的Rs-AFP2基因表达盒外，还具有1个受Ubiqutin启动子控制的Bar基因表达盒，后者可为后续利用除草剂Bialaphos筛选转化再生植株提供抗性；采用基因枪法轰击小麦品种扬麦12、济麦19、晋麦47和豫麦34幼胚共4042个，经过2～3次Bialaphos筛选，最终获得扬麦12再生植株316株；利用高效表达栽体pUAFP2的Bar和Rs-AFP2基因的特异引物对上述成活的转化植株进行PCR检测，获得Bar和Rs-AFP2基因均为阳性的植株58株，转化率为1．43％。 |
| 英文摘要: |
| Antifungal protein-2 of radish(Raphanus sativus)(Rs-AFP2) can strongly suppress the growth of Fusarium graminearum,Fusarium Culmorum and Alternaria longipes etc.Based on this property of Rs-AFP2,we expect to develope a new wheat germplasm with resistance |
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